分光光度计

分光光度计
1.仪器原理
细菌悬浮液的吸光度与菌液浓度之间呈正相关,运用分光光度计测定细菌悬浮液的吸光度值,然后与相关细菌的标准曲线进行比较,根据建立的回归方程确定细菌数量。因此,通过测定菌液的吸光度,并结合显微镜计数结果绘制出标准曲线,即可根据吸光度值计算出菌液浓度。如可通过青枯菌菌悬液浓度与吸光度相关性标准曲线(下图)计算青枯菌菌悬液浓度。

2.仪器组成
仪器主要由光源、单色器、样品室、检测器、信号处理器和显示与存储系统组成。



3.应用范围
常用于核酸,蛋白定量以及细菌生长浓度的定量。
4.使用条件
首先,菌液样品必须足够纯净,不能混入其他物质;其次,样品必须充分溶解,以便光可以顺畅通过样品而不被吸收;然后需要确认光源质量良好、稳定性高,并具有足够亮度。此外,还应保持光源周围环境的稳定,避免灰尘和其他杂质干扰光源。
5.优缺点
分光光度法以分子吸收光谱为检测基础,所用检测设备简单好操作,还具有检测准确度高、适用广泛等优点;但该方法本身的操作比较繁琐、测量耗时长、对试剂量的需求比较大,难以更为精准地检测微量物质。
参考资料:
[1]谢祯璐,杨梦婕,顾康蝶,等.分光光度计法测定不同分离源青枯雷尔氏菌菌液浓度[J].西昌学院学报(自然科学版),2022,36(02):13-16.
[2]石冬月.分光光度法与酶标仪微量法测量菌液浓度的比较[J].中国医疗器械信息,2021,27(20):22-23.